非洲豬瘟檢測儀的性能及操作使用

TH-Q320非洲豬瘟檢測儀是【天合環境】根據市場需求研發的實時檢測反應的儀器，主要由基因擴增熱循環組件、微量熒光檢測光學系統、微電路控制系統、計算機及應用軟件組成。

產品特點：

1.體積小，重量輕

整機外尺寸：寬*深*高：235×385×175mm，總重量僅5.7kg

2.升降溫速率

采用Marlow公司PCR專用大功率半導體制冷片，在保證100000次循環的壽命條件下，為模塊提供更高的升降溫速率

3.控溫精度

采用全新的控溫算法為模塊控溫提供更高的控制精度和準確度

4.溫度均勻性

全新設計的加熱體，模擬加熱體結構熱量分布，為模塊提供更好的溫度均勻性

5.高激發效率

采用CREE公司的高亮度長壽命LED作為激發光源，以低損耗玻璃光纖作為傳導介質，為試劑提供更高的激發光能量

6.高靈敏度

采用歐司朗高靈敏度，高信噪比光電二極管對微弱輻射熒光信號進行采集，為熒光檢測提供更高的靈敏度

7.激發采集波段靈活可變

標配四色熒光，熒光波段可根據客戶需求進行選擇，光譜波段更靈活，更好地匹配各廠家的熒光染料與探針

非洲豬瘟檢測儀操作步驟：

1、病毒DNA的提取（使用A盒）

（1）待檢樣品、陽性對照和陰性對照的份數總和用n表示，取n個滅菌的1.5 mL離心管，逐管編號。

（2）每管加入BufferA500mL。

（3）每管分別加入已處理的待檢樣品、陽性對照、陰性對照各200mL，充分混勻，室溫放置10分鐘。

（4）取與上述離心管等量的DNase-Free吸附柱和收集管，編號。將離心管中的溶液轉移至DNase-Free吸附柱，（為避免堵塞吸附柱，盡量不要吸懸浮雜質）。

（5）用高速離心機設置13000 r/min室溫離心30秒。

（6）棄去收集管液體，將吸附柱放回收集管中。

（7）吸附柱內加入600 μL Buffer B，13000 r/min離心30秒。

（8）棄去收集管液體，將吸附柱放回收集管中。

（9）重復步驟（7），（8）。

（10）13000 r/min空柱離心2分鐘，去除殘留液。

（11）將每個吸附柱分別移入新的1.5mL離心管中，向柱中央加入50μL Buffer C，室溫靜置1分鐘，13000 r/min離心30秒，離心管中液體即為模板DNA。獲得的DNA溶液，冰上保存備用（注意提取的DNA須在2h內進行PCR擴增，若需長期保存須放置-80℃冰箱，但應避免反復凍融）。

2、熒光PCR擴增（使用B盒）

（1）從試劑盒中取出熒光PCR反應液、Taq酶，室溫融化后，2 000 r/min離心5秒。設所需PCR管數為n（n = 樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照），每個測試反應體系需要20 μL 熒光PCR反應液和0.5 μL Taq酶。計算好各試劑的使用量，加入一適當體積小管中，充分混合均勻后，向每個PCR管中各分裝20μL。

（2）分別向上述PCR管中加入（11）中制備的DNA溶液各5μL，蓋緊管蓋，500 r/min 離心30秒。

（3）將加樣后的PCR管放入熒光PCR檢測儀內，作好標記。反應參數設置：

第一階段，預變性95℃/3分鐘

第二階段，95℃/15秒，52℃/10秒，60℃/35秒共45個循環。熒光收集在第二階段每次循環的60℃延伸時進行。